Virginia-Uhus nutzen keine Nistkästen.
Virginia-Uhus brüten typischerweise in großen Bäumen wie Eichen oder Platanen nahe offenen Feldern oder Wiesen. Sie bauen ihre Nester in Astgabeln großer Äste aus Zweigen, ausgekleidet mit Moos, Blättern und Federn. Die Nester sind groß und massiv, ca. 60–90 cm Durchmesser, 30–60 cm tief.