In der Veterinärmedizin ist die Objektträgerzubereitung ein verbreitetes Verfahren zur Untersuchung von Kot und Blut. Eine Kotuntersuchung ist die mikroskopische Analyse von Kotproben. Sie wird durchgeführt, wenn Haustiere unter Durchfall, Pressen oder Erbrechen leiden. Kotuntersuchungen bestehen aus zwei Teilen: der Kotflotation und dem direkten Kotabstrich. Die Kotflotation dient dem Nachweis mikroskopisch kleiner gastrointestinaler Parasiten wie Spulwürmer, Hakenwürmer, Peitschenwürmer, Bandwürmer, Coccidien und Giardien. Ein direkter Kotabstrich dient dem Nachweis einer Überwucherung bestimmter Bakterien im Magen-Darm-Trakt. Ein Blutabstrich wird verwendet, um abnorme Blutzellen zu erkennen. Weiße und rote Blutkörperchen sowie Blutplättchen weisen bei bestimmten Erkrankungen charakteristische und aussagekräftige Morphologien auf. Ein geschulter Tierarzt oder Techniker beurteilt Kotproben und Blutabstriche auf Parasiten, Bakterien und abnorm geformte Zellen.
Benötigte Utensilien
- Kotflotationsbehälter
- Kotflotationslösung
- Deckgläser
- Objektträger
- Feuerzeug
- Utensilien für die Gram-Färbung
- Papiertuch
- Mikroskop
- Hämatokritkapillare
- Diff-Quick-Utensilien
Anleitung
Kotflotation
- Entnehmen Sie eine Kotprobe. Tierhalter können eine Probe mitbringen oder eine Probe wird mittels einer Kotschlinge, die 2,5 bis 7,5 Zentimeter in das Rektum eingeführt wird (je nach Größe des Tieres), entnommen.
- Geben Sie das Kotmaterial in einen Kotbehälter. Diese Behälter sind im Handel erhältlich und ähneln einem Reagenzglas oder Probengläschen.
- Füllen Sie den Kotbehälter etwa zur Hälfte mit Flotationslösung und bewegen Sie die Kotschlinge. Das Kotmaterial zersetzt sich. Entfernen Sie so viel Material wie möglich von der Kotschlinge (falls eine verwendet wurde). Ist das Material zerkleinert, füllen Sie den Behälter bis zum oberen Rand mit Flotationslösung.
- Legen Sie ein Deckglas auf den Behälter und warten Sie 10 Minuten, bevor Sie fortfahren. Parasiteneier steigen an die Oberfläche und haften am Deckglas.
- Legen Sie das Deckglas mit dem haftenden Material auf einen Objektträger. Das haftende Material sollte sich zwischen Deckglas und Objektträger befinden. Der Objektträger ist bereit für die mikroskopische Analyse.
Direkter Kotabstrich
- Entnehmen Sie eine kleine Menge Kotmaterial. Die benötigte Menge beträgt etwa das halbe Volumen eines Centstücks.
- Verteilen Sie das Kotmaterial dünn auf einem Objektträger. Das Material sollte den Träger gleichmäßig bedecken. Oft wird ein zweiter Objektträger zum Verteilen verwendet.
- Fixieren Sie den Inhalt des Objektträgers mit einem Feuerzeug. Erwärmen Sie die saubere Seite des Objektträgers sanft für 5 bis 10 Sekunden, sodass alles Material auf dem Objektträger trocknet und die Probe am Glas haftet.
- Färben Sie den Objektträger gemäß den Gram-Färbungsprotokollen.
- Warten Sie, bis der Objektträger trocken ist. Legen Sie den Objektträger aufrecht mit einem Papiertuch darunter, um überschüssige Färbemittel aufzunehmen. Der Objektträger trocknet in etwa 15 Minuten. Ist er trocken, ist er bereit für die Analyse.
Blutabstrich
- Entnehmen Sie eine periphere Blutprobe vom Haustier. Dies kann nur in einer Tierarztpraxis erfolgen. Eine periphere Blutprobe stammt aus einer Beinvene. Geben Sie das Blut in ein nicht gerinnendes Blutprobengläschen, das mit Heparin oder EDTA gefüllt ist.
- Entnehmen Sie mit einer Nadel und Spritze eine kleine Blutprobe aus dem nicht gerinnenden Gläschen. Injizieren Sie eine kleine Menge davon in eine Hämatokritkapillare. Geben Sie einen Tropfen Blut aus der Hämatokritkapillare auf einen Objektträger.
- Verteilen Sie den Tropfen mit einem zweiten Objektträger. Dieser zweite Objektträger sollte im 45-Grad-Winkel zum ersten stehen: Würden die Objektträger Uhrzeiger darstellen, wäre die Zeit 10:15. In dieser Metapher ist der „Stunden“-Objektträger der zweite, angulierte Träger, während der „Minuten“-Objektträger die Blutprobe enthält. Schieben Sie den „Minuten“-Objektträger über die Oberfläche des „Stunden“-Objektträgers. Dadurch wird das Blut über den Strich gezogen.
- Warten Sie 5 bis 10 Minuten, bis der Objektträger an der Luft trocknet.
- Färben Sie den Objektträger mit Diff-Quick-Färbemittel. Lassen Sie den Objektträger 5 bis 10 Minuten trocknen. Legen Sie den Objektträger aufrecht mit einem Papiertuch darunter, um überschüssiges Färbemittel aufzunehmen. Der Objektträger ist bereit für die Analyse.