Männliche und weibliche Opossums paaren sich durch kloakalen Kontakt. Beide Geschlechter verfügen über eine Kloake, eine gemeinsame Öffnung für Verdauungs-, Harn- und Fortpflanzungssystem. Während der Balz jagt und beschnüffelt das Männchen das Weibchen und markiert sie mit Duftstoffen. Ist sie empfänglich, senkt sie den Körper und präsentiert ihre Kloake. Das Männchen richtet seine Kloake auf die ihre aus, und sein erigierter, gegabelter Penis ermöglicht den inneren Samentransfer. Nach der Paarung trennt sich das Paar, und das Weibchen zieht die Jungen allein auf. Die Tragzeit der Opossums beträgt nur etwa 12 bis 13 Tage, und Weibchen können mehrmals im Jahr große Würfe zur Welt bringen.